PCR實(shí)驗(yàn)室最容易忽視的環(huán)節(jié)，對(duì)試驗(yàn)輔料進(jìn)行質(zhì)檢。PCR實(shí)驗(yàn)室的輔料指的是PCR實(shí)驗(yàn)中常用的一些輔助試劑和耗材，比如采樣管、拭子、離心管、PCR管、吸頭、移液器、無(wú)核酸酶水和試管架等。
PCR管是用于聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）實(shí)驗(yàn)的容器，常見(jiàn)的種類包括單管、8聯(lián)管、12聯(lián)管等。這些管子根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求和PCR儀的適配性來(lái)選擇，比如單管適合少量樣本檢測(cè)，8聯(lián)管是最常用的選擇，而12聯(lián)管則提供了更高的靈活性和性價(jià)比。PCR管的體積有0.1ml和0.2ml兩種，其中0.1ml管由于死體積小、減少水蒸氣影響、降低掛壁冷凝水以及提高熒光捕獲率，通常能提供更好的擴(kuò)增結(jié)果和實(shí)驗(yàn)穩(wěn)定性。
PCR管的分類：
1. 單管：適用于單個(gè)或少量樣本的檢測(cè)。
2. 8聯(lián)管：最常用，操作便利，每個(gè)管有獨(dú)立蓋子。
3. 連蓋8聯(lián)管：每個(gè)管獨(dú)立連蓋，避免操作污染，方便加樣。
4. 12聯(lián)管：操作靈活，性價(jià)比優(yōu)于8聯(lián)管。
PCR管性能檢測(cè)：
（1）滲漏密閉性：將n個(gè)PCR管加入半量墨汁，蓋好蓋子后放入水中，浸泡30min，沒(méi)有墨汁滲出為合格。
（2）離心密閉性：將n個(gè)PCR管加入半量純水，放入離心機(jī)，1000 rpm，30min，管蓋未崩開(kāi)未漏液為合格。
（3）熱密閉性：將n個(gè)PCR管加入半量純水，蓋好蓋子稱重后放入PCR儀，設(shè)置一個(gè)常用的PCR程序，程序運(yùn)行完畢后，再進(jìn)行稱重，PCR管未變形，管蓋未崩開(kāi)未漏液，前后重量未變化為合格。。
（4）冷密閉性：將n個(gè)PCR管加入半量純水，放入-20℃冰箱，24h，離心管未變形，管蓋未崩開(kāi)未漏液為合格。
（5）污染物質(zhì)檢：將n個(gè)PCR管加入半量陰性純水，蓋好蓋子渦旋1 min后靜置5min，作為模板進(jìn)行擴(kuò)增，qPCR無(wú)擴(kuò)增為合格。
（6）抑制物質(zhì)檢：將n個(gè)PCR管分別加入弱陽(yáng)性質(zhì)控物,室溫靜置5min，然后進(jìn)行提取;RNA核酸，DNA核酸，室溫靜置5min，作為模板進(jìn)行擴(kuò)增，qPCR擴(kuò)增未被抑制為合格。
（7）空白熒光通透性：對(duì)于qPCR,需要考察PCR管是否有非特異性熒光信號(hào)，將n個(gè)空PCR管，蓋好蓋子后放入PCR儀，設(shè)置一個(gè)常用的PCR程序，程序運(yùn)行完畢后，qPCR無(wú)擴(kuò)增為合格。
（8）陽(yáng)性熒光通透性：對(duì)于qPCR,還需要考察PCR管是否會(huì)抑制熒光的通透性，將n個(gè)含弱陽(yáng)性樣品和擴(kuò)增試劑的PCR管，與確認(rèn)無(wú)熒光干擾的PCR管，蓋好蓋子后放入PCR儀一同擴(kuò)增，設(shè)置一個(gè)常用的PCR程序，程序運(yùn)行完畢后，qPCR擴(kuò)增未被抑制為合格。
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