測(cè)任何目標(biāo)蛋白的抗體不止一種,同一家抗體公司可能有好幾種,甚至幾十種。在不同的抗體公司,則更多。那么在眼花繚亂的抗體陣中,如何選擇自己實(shí)驗(yàn)需要的抗體呢?選擇適合實(shí)驗(yàn)的抗體需要綜合考慮多個(gè)因素,包括實(shí)驗(yàn)類型、樣本種屬、抗體的特異性、宿主物種來源以及是否需要熒光標(biāo)記等。
ELISA試劑盒中HRP底物范圍較廣,HRP即辣根過氧化物酶(Horseradish Peroxidase)比活性高,穩(wěn)定,分子量小,純酶容易制備,所以最常用。過氧化物酶作為多個(gè)試劑盒顯色體系的關(guān)鍵成分,對(duì)試劑盒的質(zhì)量有重要影響。辣根過氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP)的顯色原理基于其酶催化作用(氧化作用)。HRP酶標(biāo)二抗,即辣根過氧化物酶標(biāo)記的二抗,是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常規(guī)用的二抗。其特點(diǎn)包括比活性高、穩(wěn)定性好、分子量小、純酶容易制備等,因此在免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)中廣泛應(yīng)用。HRP底物主要包括二氨基聯(lián)苯胺(DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。
免疫熒光(IF)是一種用于檢測(cè)以及識(shí)別細(xì)胞和組織中蛋白質(zhì)和其他分子的亞細(xì)胞分布和遷移的強(qiáng)大檢測(cè)技術(shù)。IF可用作免疫組織化學(xué) (IHC) 或免疫細(xì)胞化學(xué) (ICC) 中使用的傳統(tǒng)顯色標(biāo)記的替代物。通過使用多種標(biāo)記物的二級(jí)抗體,可以研究感興趣蛋白的共定位,這是不能通過常規(guī)IHC或ICC實(shí)現(xiàn)。這是同時(shí)分析許多目標(biāo)蛋白時(shí)的一個(gè)優(yōu)勢(shì),可同時(shí)生成大量亞細(xì)胞定位的準(zhǔn)確數(shù)據(jù)。免疫熒光染色是一種常用的細(xì)胞和組織學(xué)研究技術(shù),它利用特異性抗體與標(biāo)記熒光染料結(jié)合,來檢測(cè)和定位細(xì)胞中的特定蛋白質(zhì)或其他分子。
在生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域,ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))試劑盒作為一種常用的實(shí)驗(yàn)工具,扮演著舉足輕重的角色。尤其在針對(duì)小鼠的實(shí)驗(yàn)研究中,選擇合適的ELISA試劑盒直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。本文將從多個(gè)維度出發(fā),詳細(xì)闡述如何挑選適合小鼠研究的ELISA試劑盒,旨在為科研人員提供一份實(shí)用的指南。